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Real-time investigation of dynamic protein crystallization in living cells

机译:活细胞中动态蛋白质结晶的实时研究

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摘要

X-ray crystallography requires sufficiently large crystals to obtain structural insights at atomic resolution, routinely obtained in vitro by time-consuming screening. Recently, successful data collection was reported from protein microcrystals grown within living cells using highly brilliant free-electron laser and third-generation synchrotron radiation. Here, we analyzed in vivo crystal growth of firefly luciferase and Green Fluorescent Protein-tagged reovirus μNS by live-cell imaging, showing that dimensions of living cells did not limit crystal size. The crystallization process is highly dynamic and occurs in different cellular compartments. In vivo protein crystallization offers exciting new possibilities for proteins that do not form crystals in vitro.
机译:X射线晶体学需要足够大的晶体才能以原子分辨率获得结构见解,这通常是通过费时的筛选在体外获得的。最近,已经报道了通过使用高亮度自由电子激光和第三代同步加速器辐射在活细胞内生长的蛋白质微晶成功收集数据的方法。在这里,我们通过活细胞成像分析了萤火虫萤光素酶和绿色荧光蛋白标签呼肠孤病毒μNS的体内晶体生长,显示活细胞的大小并不限制晶体大小。结晶过程是高度动态的,并且发生在不同的细胞室中。体内蛋白质结晶为体外无法形成晶体的蛋白质提供了令人兴奋的新可能性。

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