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A rapid method for detecting specific amplified PCR fragments in microtiter plates.

机译:快速检测微量滴定板中特异扩增PCR片段的方法。

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摘要

A simple method is presented to circumvent laborious and time consuming electrophoretic separations of specific PCR amplification products. Specific target DNA is amplified using nucleotides labelled with DIG-dUTP or biotin-dCTP. The labelled PCR products are separated from unincorporated nucleotides or oligonucleotides by using a positively charged DEAE cellulose matrix. Amplification products are visualized directly in the matrix using immunoenzymatic methods or streptavidin-conjugated enzymes. The detection process can be carried out within 2 h, allows the processing of large sample sizes and can potentially be automated.
机译:提出了一种简单的方法来避免费力且费时的特定PCR扩增产物的电泳分离。使用标记有DIG-dUTP或生物素-dCTP的核苷酸扩增特定的靶DNA。通过使用带正电的DEAE纤维素基质,可以将标记的PCR产物与未掺入的核苷酸或寡核苷酸分离。使用免疫酶方法或抗生蛋白链菌素偶联的酶可以直接在基质中观察扩增产物。检测过程可以在2小时内进行,可以处理大量样品,并且可以实现自动化。

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