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High frequency cell type-specific visualization of fluorescent-tagged genomic sites in interphase and mitotic cells of living Arabidopsis plants

机译:活拟南芥植物的相间和有丝分裂细胞中荧光标记的基因组位点的高频细胞类型特异性可视化

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摘要

BackgroundInterphase chromosome organization and dynamics can be studied in living cells using fluorescent tagging techniques that exploit bacterial operator/repressor systems and auto-fluorescent proteins. A nuclear-localized Repressor Protein-Fluorescent Protein (RP-FP) fusion protein binds to operator repeats integrated as transgene arrays at defined locations in the genome. Under a fluorescence microscope, the tagged sites appear as bright fluorescent dots in living cells. This technique has been used successfully in plants, but is often hampered by low expression of genes encoding RP-FP fusion proteins, perhaps owing to one or more gene silencing mechanisms that are prevalent in plant cells.
机译:背景技术可以利用荧光标记技术在活细胞中研究相间染色体的组织和动力学,该技术利用细菌操作员/阻遏物系统和自发荧光蛋白。核定位的阻遏蛋白-荧光蛋白(RP-FP)融合蛋白结合到作为基因组定义位置的转基因阵列整合的操纵基因重复序列上。在荧光显微镜下,标记的位点在活细胞中显示为明亮的荧光点。这项技术已在植物中成功使用,但通常由于编码RP-FP融合蛋白的基因表达不足而受到阻碍,这可能是由于一种或多种植物细胞中普遍存在的基因沉默机制所致。

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