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Microchamber Device for Detection of Transporter Activity of Adherent Cells

机译:用于检测贴壁细胞转运蛋白活性的微腔装置

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摘要

We present a method to detect the transporter activity of intact adherent cells using a microchamber device. When adherent cells are seeded onto the poly-di-methyl siloxane substrate having microchambers with openings smaller than the size of a cell, the cells form a confluent layer that covers the microchambers, creating minute, confined spaces. As substances exported across the cell membrane accumulate, transporter activity can be detected by observing the fluorescence intensity increase in the microchamber. We tested the microchamber device with HeLa cells over-expressing MDR1, an ATP-binding cassette transporter, and succeeded in detecting the transport of fluorescence-conjugated paclitaxel, the anti-cancer drug, at the single-cell level.
机译:我们提出了一种使用微腔设备检测完整贴壁细胞转运蛋白活性的方法。当将贴壁细胞接种到具有微腔室的聚二甲基硅氧烷基材上时,该微腔室的开口小于细胞的大小,这些细胞会形成覆盖微腔室的融合层,从而形成微小的密闭空间。随着跨细胞膜输出的物质的积累,可以通过观察微腔中荧光强度的增加来检测转运蛋白的活性。我们用过表达MDR1(一种ATP结合盒转运蛋白)的HeLa细胞测试了微腔装置,并成功在单细胞水平上检测了荧光缀合的紫杉醇(一种抗癌药)的转运。

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