小鼠卵泡内M-CSF和NPPC的表达情况及相互影响

摘要

目的 观察小鼠卵泡中巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)及其受体(M-CSFR)对C型尿钠肽前体(NPPC)表达的影响,探讨其是否参与减数分裂恢复中的信号传导.方法 通过培养小鼠卵泡,根据培养基的不同分为5组,分别为空白对照组:置于37℃MEMα培养液中培养;人绒毛膜促性腺激素(HCG)组:在MEMα培养液中滴入HCG 5IU;M-CSF组:在MEMα培养液中加入M-CSF 200ng/ml;GW2580组:在MEMα培养液中加入M-CSFR阻滞剂GW2580 1μmol/L;M-CSF+GW2580组:在MEMα培养液中同时加入M-CSF 200ng/ml及GW2580 1μmol/L.分别于0.5、1、2、4h收集卵泡,采用荧光定量聚合酶链式反应检测各组卵泡内M-CSF、M-CSFR 及 NPPC mRNA表达水平.结果 空白对照组 M-CSF、M-CSFR mRNA表达水平呈上升趋势,而HCG组M-CSF、M-CSFR mRNA均呈低水平表达.空白对照组NPPC mRNA未见明显增减,而HCG组可见NPPC mRNA先逐步上升后快速下降,并在2h达到峰值.M-CSF组NPPC mRNA变化曲线与HCG组相类似.GW2580组和M-CSF+GW2580组NPPC mRNA表达水平与空白对照组未见明显差异.结论 黄体生成素峰在卵泡内可能经由M-CSF介导的一系列信号传导而影响NNPC的表达,最终使得减数分裂恢复.