在动物模型脏器中动态追踪荧光染料标记的目标细胞

摘要

目的 利用染料羧基荧光素二乙酸盐琥珀酰亚胺酯(CFDA-SE)标记细胞,通过测定荧光信号强度计算细胞数量,作为追踪移植细胞进入模型动物体内后分布情况的方法.方法 采用CFDA-SE标记不同类细胞,荧光显微镜计数染色率,台盼蓝计数存活率,酶标仪检测荧光信号,确定不同种类、同种细胞不同状态下及模拟动物体内细胞数与荧光信号之间的线性关系,制作标准曲线,确定利用该染料作细胞计数的可行性.将CFDA-SE标记细胞经脾脏注入小鼠体内,于3h、6h、12h、24h处死小鼠,检测肝脏信号,根据标准曲线定量计算肝脏内该细胞动力学特征.结果 CFDA SE括记细胞后,荧光信号与细胞数相关性较好,24h内随时间增加荧光信号有所增高,但与细胞数相关性不受影响.加入小鼠内脏组织匀浆后,荧光信号值有所降低,但与细胞数的相关性不受影响.结论 CFDA-SE可标记活细胞,操作简单,标记率高,注入体内后,通过严格制作标准曲线,检测脏器荧光信号,可定量确定细胞在体内脏器的的动态分布,方法简单可靠.