内翻畸形膝关节骨关节炎患者关节液对软骨细胞的影响

摘要

目的探讨内翻畸形膝关节骨关节炎(KOA)患者关节液对软骨细胞增殖、凋亡、自噬的影响。方法选取本院2019年5月至8月内翻畸形伴有外侧间室关节软骨病变的KOA患者7例(观察组)及内翻畸形无外侧间室关节软骨病变的KOA患者10例(对照组)。在无菌条件下分离4周龄新西兰大白兔双侧膝关节软骨细胞,观察组患者关节液培养软骨细胞作实验组,对照组患者关节液培养软骨细胞作阴性对照组,另设常规培养软骨细胞作空白组。共培养完成后,观察其对软骨细胞增殖、凋亡及自噬的影响。结果观察组患者关节液中IL-1β、TNF-α、IL-6、MMP-13的含量水平显著高于对照组(P<0.01)。甲苯胺蓝染色鉴定显示培养的软骨细胞核呈深染色,细胞质呈淡蓝色。与空白组细胞相比,实验组软骨细胞的细胞活力显著降低(P<0.01),细胞凋亡率显著升高(P<0.01),并伴随着LC3B蛋白表达显著上升(P<0.01)及显著减少P62蛋白表达(P<0.01)。同时,实验组及阴性对照组软骨细胞中PCNA、Bcl-2、P62与BMP-2蛋白表达水平均显著降低,且Bax、LC3、Beclin-1、PI3K、AKT与mTOR的蛋白表达均显著高于空白组。结论KOA患者关节液可能通过激活PI3K/AKT/mTOR通路增强细胞自噬,而抑制软骨细胞增殖,诱导细胞凋亡,这可能是KOA潜在病理机制。