基于NLRP3/Caspase-1信号通路研究三叶香茶菜抗小鼠CCL4急性肝损伤机制

摘要

目的研究三叶香茶菜对四氯化碳(carbon tetrachloride,CCL4)急性肝损伤小鼠NLRP3/casepase-1信号通路的影响。方法采用CCL_(4)小鼠急性肝损伤动物模型,随机分为模型组,正常组,联苯双脂组,三叶香茶菜组分别为高(150 g·kg^(-1))、中(75 g·kg^(-1))、低(37.5 g·kg^(-1))剂量组(按生药量计)。各组干预7天后,于第7天晚上注射CCL4油溶液诱导急性肝损小鼠动物模型(除正常组外)。12 h后,称量各组肝、脾重量,并计算肝、脾指数,生化法检测各组小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)活力、谷草转氨酶(AST)活力,ELISA法检测小鼠血清半胱肽氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)水平及肝组织NLR家族含有Pyrin结构域的蛋白质3(NLR Family,Pyrin Domain Containing Protein 3,NLRP3)含量。同时,采用免疫组化检测肝组织中NLRP3含量。取肝组织制成病理切片,苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)染色后观察肝组织细胞形态学变化,并评分。结果(1)各组肝指数与模型组比较无明显变化(P<0.05);与模型组比较,正常组、联苯双脂组、三叶香茶菜低剂量组脾指数均显著下降(P<0.05)。(2)与正常组对比,模型组小鼠血清ALT、AST、Caspase-1、IL-1β以及小鼠肝组织NLRP3显著升高(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,各组小鼠血清ALT、AST、Caspase-1、IL-1β以及小鼠肝组织NLRP3显著下降(P<0.05或P<0.01);但模型组与三叶香茶菜低剂量组对比,小鼠血清ALT、Caspase-1、IL-1β无显著性差异(P<0.05)。(3)光镜下观察发现,与模型组相比,三叶香茶菜高、中、低剂量组小鼠肝组织损伤明显减少,肝组织细胞坏死细胞减轻,有少量炎性浸润,各组病理评分差异具显著性差异(P<0.05)。结论三叶香茶菜对CCL_(4)诱导急性肝损伤小鼠具有保护作用,其护肝作用机制可能是是通过抑制NLRP3/Caspase-1信号通路的活化,减少炎症介质释放,从而抑制肝组织炎症损害。