基于miR23b调控的GABA能神经元功能研究电针镇痛的机理

摘要

目的观察电针(electroacupuncture,EA)GB30(环跳)、GB34(阳陵泉)对慢性压迫损伤(chronic compression injury,CCI)模型大鼠GABA能神经元功能的影响,分析电针镇痛与miR23b调控的GABA能神经元功能的关系。方法将52只SPF级SD雄性大鼠,随机均分为正常组、CCI组、CCI+EA组、CCI+miR23b组,每组13只。CCI组、CCI+EA组、CCI+miR23b组进行左侧坐骨神经结扎手术造成CCI模型,正常组除不结扎坐骨神经,其余步骤一样。术后CCI+miR23b组进行两次腰部硬脊膜注射miR23b,术后第4天进行第1次注射miR23b,第8天注射第2次miR23b,每次注射12.5μL,术后第14天取组织。CCI+EA组进行左侧GB30、GB34电针,每天电针1次,每次30 min,连续电针10天。实验结束后取动物脊髓腰段膨大组织及血清,进行实时定量PCR法检测GABA(A)、GABA(B)、miR23b的表达,ELISA法检测GABA的含量、原位杂交检测miR23b指标及免疫组化检测GABAAR beta-1,GABA B R2的表达。结果采用ELISA法检测大鼠血清GABA的含量的实验结果表明,与CCI组比,CCI+miR23b组、CCI+EA组大鼠血清GABA含量明显上调,差异具有显著性意义(P<0.05)。实时定量PCR的实验结果表明,与正常组比,CCI组大鼠的GABAA、GABAB及miR23b表达明显下调(P<0.05);与CCI组比,CCI+miR23b组、CCI+EA组GABAA、GABAB及miR23b表达明显上调(P<0.05)。原位杂交及免疫组化检测结果表明,与CCI组比,CCI+miR23b组、CCI+EA组GABA A R beta-1、GABA B R2、miR23b免疫阳性细胞表达灰度值明显下调,即表达上升,差异具有显著性意义(P<0.05)。结论电针可以调节疼痛引起的GABA A R beta-1、GABA B R2及miR23b指标的改变。说明电针通过调控miR23b的表达,改善疼痛模型大鼠脊髓背角GABA能神经元功能,达到镇痛的效果。