Expression of angiostatin cDNA in human gallbladder carcinoma cell line GBC-SD and its effect on endothelial proliferation and growth

摘要

瞄准：在癌房间在试管内和在试管内，和潜力为胆囊癌 angiostatin 基因治疗珍视的胆囊的生物学的行为上探索 angiostatin 起来规定的影响。方法：包含鼠科的 angiostatin 的 pcDNA3.1 (+) 的真核细胞的表示向量被限制 endonuclease 消化构造并且识别并且定序。recombinant 向量 pcDNA3.1-angiostatin 与向量和嘲笑控制是进有 Lipofectamine 2000，和 paralleled 的人的胆囊癌房间线 GBC-SD 的 transfected。抵抗克隆被 G418 过滤屏蔽。Angiostatin 抄写和蛋白质表示被 RT-PCR 检验，免疫荧光并且西方污点。上层清液被收集对待 endothelial。细胞增长和生长在试管内在显微镜下面被观察。结果：鼠科的 angiostatin cDNA 成功地被克隆进真核细胞的表示向量 pcDNA3.1 (+) 。在有 G418 的 transfection 和选择的 14 d 以后，宏观的抵抗房间克隆与 3.1 (+)-angiostatin 和向量控制的 pcDNA 在试验性的组 transfected 被形成。但是未经治疗的房间在嘲笑控制死了。Angiostatin 被 RT-PCR 检测，蛋白质表示被免疫荧光在试验性的组检测并且西方污点。在三个组的房间增长和生长在试管内在显微镜下面分别地被观察。没有有效差量处于在是有或没有 angiostatin 的 transfected 的组之间的 GBC-SD 细胞的生长速度被观察。有上层清液的术后疗法，有效差量在内皮被观察房间(ECV-304 ) 生长在试管内。细胞增长和生长被禁止。结论：Angiostatin 直接不禁止人的胆囊癌房间增长和生长在试管内，但是 angiostatin 的分泌物住在内皮房间增长和生长。