胃癌间质干细胞调节中性粒细胞极化的作用及分子机制

摘要

目的 :探讨胃癌间质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）条件培养液对调节中性粒细胞极化的作用及可能的分子作用机制。方法:采用免疫组织化学和HE染色法检测胃癌组织中中性粒细胞和MSCs的浸润情况。采用趋化实验检测胃癌MSCs条件培养液对中性粒细胞的趋化作用;用胃癌MSCs条件培养液处理中性粒细胞18 h后,FCM法检测中性粒细胞的凋亡情况;实时荧光定量PCR法检测中性粒细胞中抗凋亡相关基因MCL-1以及极化相关基因自杀相关因子（factor associated suicide,FAS）、细胞间黏附分子-（1intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1）、单核细胞趋化蛋白1（monocyte chemotactic protein 1,MCP1,又称为CCL2）和白细胞介素8（interleukin-8,IL-8）m RNA的表达情况。将胃癌MSCs条件培养液处理的中性粒细胞作用于胃癌SGC-7901细胞,采用Transwell小室迁移实验检测对胃癌SGC-7901细胞迁移能力的影响。蛋白质印迹法检测胃癌MSCs条件培养液处理的中性粒细胞中细胞外信号调节激酶（extracellular signal-regulated kinase,ERK）信号通路的活化情况。结果 :胃癌组织中存在中性粒细胞和MSCs的浸润。胃癌MSCs条件培养液能高效诱导中性粒细胞的趋化（P＜0.01）;胃癌MSCs条件培养液处理后的中性粒细胞,凋亡率明显下降（P＜0.05）,MCL-1 m RNA的表达水平则明显上调（P＜0.05）;极化相关基因FAS和ICAM-1 m RNA的表达水平明显下调（P＜0.05和P＜0.01）,CCL2和IL-8 m RNA的表达水平均明显上调（P值均＜0.01）。SGC-7901细胞与胃癌MSCs条件培养液预处理的中性粒细胞共培养后,其迁移能力明显增强（P＜0.01）。胃癌MSCs条件培养液预处理中性粒细胞15 min后,中性粒细胞中磷酸化ERK（phospho-ERK,p-ERK）蛋白的表达水平显著升高（P＜0.05）。结论 :胃癌MSCs条件培养液能够调节中性粒细胞趋化并抑制其自发性凋亡;诱导中性粒细胞N2型极化并促进胃癌细胞迁移;这可能与中性粒细胞内ERK信号通路被激活相关。