羟基红花黄色素A对脑组织蛋白质硝基化及对损伤侧脑组织保护作用的研究

摘要

目的探究羟基红花黄色素A(hydroxysafflor yellow A,HSYA)通过细胞实验及动物实验对损伤侧脑组织的保护作用,观察ONOO-及Heme/NaNO_(2)/H_(2)O_(2)途径对脑组织蛋白硝基化以及HSYA的影响,探讨HSYA对损伤脑组织的保护作用。方法选取30只SD大鼠分为正常组(Control组)、模型组(Model组)及HSYA干预组(HSYA组)。采用Western blot检测3-NT蛋白表达水平,通过细胞实验观察HSYA对脑缺血再灌注损伤诱导的脑组织蛋白质硝基化、总抗氧化能力(T-AOC)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)表达情况的影响,初步探讨HSYA对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用机制。选取120只SD大鼠分为假手术组(Sham组)、脑缺血再灌注模型组(CIRI组)及HSYA治疗组(HSYA+CIRI组)。通过改良线栓法制备大鼠脑梗死模型,采用免疫组化及Western blot检测3-NT蛋白表达水平,使用ABTS法检测T-AOC,使用ELISA法检测CAT、SOD及GSH-Px。结果经细胞实验发现ONOO-及Heme/NaNO_(2)/H_(2)O_(2)途径均可增加脑组织中3-NT且经HSYA预处理后对3-NT具有明显抑制作用。HSYA组脑组织中3-NT含量明显低于Model组(P<0.05)。经动物实验发现HSYA具有改善CIRI后脑组织的损伤,降低3-NT蛋白表达,升高T-AOC、CAT、SOD及GSH-Px在脑组织内中含量,对损伤侧脑组织具有保护作用。HSYA+CIRI组损伤侧脑组织中3-NT蛋白含量明显低于CIRI组(P<0.05),损伤侧脑组织中3-NT阳性细胞数明显低于CIRI组(P<0.05),损伤侧脑组织中T-AOC、CAT、SOD及GSH-Px含量明显高于CIRI组(P<0.05)。结论HSYA可抑制ONOO-及Heme/NaNO_(2)/H_(2)O_(2)途径在体外对脑组织蛋白硝基化的修饰作用,且HSYA可抑制损伤侧脑组织中3-NT含量,提高T-AOC、CAT、SOD及GSH-Px含量,具有较强抗氧化作用。