敦煌医学古方大补脾汤对放射性肺损伤大鼠AMPK/mTOR信号通路及自噬的影响

摘要

目的:探讨敦煌医学古方大补脾汤对放射性肺损伤大鼠AMP活化蛋白激酶(AMPK)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路及自噬的影响。方法:将40只SPF级SD大鼠随机分为正常组、模型组、单次(照射前)给药组、两次(照射前后)给药组,每组10只。单次给药组、两次给药组预先灌胃大补脾汤12.14 g/kg,正常组和模型组灌胃2 mL生理盐水,1 d 1次,连续14 d。14 d后,模型组、单次给药组、两次给药组大鼠右肺予8 Gy X射线单次照射,正常组不予照射。照射后,两次给药组继续给予大补脾汤灌胃,其余各组灌胃等容积生理盐水,1 d 1次,连续14 d。处死所有大鼠,采用酶联免疫吸附试验检测大鼠血清中AMPK、mTOR、P62、Beclin1含量,采用蛋白质印迹法检测大鼠右肺组织中AMPK、mTOR、P62、Beclin1蛋白表达,采用定量聚合酶链反应检测大鼠右肺组织中AMPK、mTOR、P62、Beclin1信使核糖核酸(mRNA)表达。结果:与正常组对比,模型组大鼠血清中AMPK、mTOR、Beclin1含量升高、P62含量下降,差异有统计学意义(P<0.01);右肺组织中AMPK、mTOR、Beclin1蛋白及mRNA表达上调、P62蛋白及mRNA表达下调(P<0.01)。与模型组对比,单次给药组和两次给药组大鼠血清中AMPK、mTOR、Beclin1含量下降、P62含量升高(P<0.01);右肺组织中AMPK、mTOR、Beclin1蛋白及mRNA表达下调、P62蛋白及mRNA表达上调(P<0.01)。其中,两次给药组各项指标较单次给药组变化更为明显(P<0.05或P<0.01)。结论:放射性肺损伤大鼠模型中自噬被激活并参与其发生,大补脾汤通过调控AMPK/mTOR自噬信号通路及自噬蛋白P62、Beclin1表达,抑制过度自噬,发挥对放射性肺损伤的防护作用。