苹果自交不亲和基因PCR扩增程序优化

摘要

通过研究PCR反应体系(DNA、Primer、Mg2+、dNTP、Taq聚合酶、buffer)及退火温度对苹果自交不亲和基因(S基因)扩增结果影响的分析,构建了适合于苹果自交不亲和基因的PCR扩增程序的优化体系.结果表明:在20μL的反应体系中,模板DNA的最适含量为40 ng,dNTP最适浓度为0.25 mmol/L,而Primer最适浓度为0.4 μmol/L,Mg2+的最适浓度为2.5 mmol/L,Taq聚合酶最适浓度为1 U,buffer最适浓度为1×buffer,最适退火温度为50℃.