噬菌体MS2和φX174的双层琼脂平板和液体培养基扩增方法的建立

摘要

噬菌体MS2和φX174曾广泛作为指示病毒,用来研究病毒在土柱和田间实验条件下的迁移行为.本文详细介绍了实验室小规模双层琼脂平板扩增和大规模高复数感染法制备纯噬菌体溶液的条件和方法步骤.宿主细菌E.coli(ATCC 15597)的最佳培养时间为90～120 min,而E.coli(ATCC 13706)的最佳培养时间为120～150 min,在上述时间段内,它们的生长分别进入对数期.小规模双层琼脂平板扩增方法耗时、耗力,但用高复数感染扩增方法可获取一次大量(约500 ml)的高浓度纯噬菌体MS2和φX174溶液,它们的含量分别可达1011 pfu/ml和108 pfu/ml.