超声辐照携带miR-520c-3p和miR-132微泡对卵巢癌A2780/DDP细胞生物学活性影响及其机制研究

摘要

目的探讨超声辐照携带miR-520c-3p和miR-132微泡对卵巢癌A2780/DDP细胞生物学活性影响,并进行机制研究。方法将对数生长期的A2780/DDP细胞随机分为A组(空白对照)、B组(微泡造影剂+超声辐照)、C组(miR-520c-3p mimics+miR-132 negative control+微泡造影剂+超声辐照)、D组(miR-132 mimics+miR-520c-3p negative control+微泡造影剂+超声辐照)、E组(miR-520c-3p mimics+miR-132 mimics+微泡造影剂+超声辐照),48h后收集细胞。实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)测定miR-520c-3p、miR-132表达水平以及磷脂酰肌醇蛋白多糖-3(GPC3)信使核糖核酸(mRNA)相对表达量,蛋白免疫印迹法测定GPC3和Hippo信号通路蛋白相对表达量。MTT法检测细胞增殖,Transwell法检测细胞迁移,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡。结果与A组和B组比较,C组和E组miR-520c-3p表达水平显著上调,D组和E组miR-132表达水平显著上调(P<0.05);与A组和B组比较,C组、D组和E组细胞增殖抑制率和细胞凋亡率显著增加,穿膜细胞数和Yes相关蛋白(YAP)和TAZ蛋白相对表达量显著减少,其中E组变化最明显(P<0.05);与A组和B组比较,C组和E组GPC3蛋白相对表达量显著降低(P<0.05)。结论超声辐照携带miR-520c-3p和miR-132微泡可显著抑制卵巢癌A2780/DDP细胞增殖和迁移,并诱导其凋亡,作用机制可能与调节GPC3蛋白表达和Hippo-YAP/TAZ通路传导有关。