原因不明复发性自然流产患者血清IL-10水平变化及其与miR-513c-5p的调控关系

摘要

目的 观察并检测原因不明复发性自然流产(URSA)患者外周血细胞因子白细胞介素10(IL-10)、miR-513c-5p水平变化,探讨二者在URSA发病中的作用.方法 选取30例正常早孕妇女(正常妊娠组)和30例URSA患者(URSA组),抽取空腹外周静脉血,ELISA法检测血清IL-10蛋白,qPCR法检测单个核细胞(PBMC)中的miR-513c-5p.采用Target Scan7.1生物信息软件,预测miR-513c-5p与IL-10 mRNA的3'非翻译区(3'UTR)是否可能存在互补结合;双荧光素酶报告基因系统检测miR-513c-5p对IL-10 mRNA 3'UTR荧光素酶报告基因活性的影响.分别构建包含结合位点的野生型及突变型IL-10 mRNA 3'UTR质粒,将293T细胞分为过表达组、抑表达组、对照组,分别转染miR-513c-5p mimics、inhibitor及阴性对照;qPCR法检测各组293T细胞中的IL-10 mRNA,ELISA法检测细胞培养上清液中的IL-10蛋白.结果 URSA组血清IL-10蛋白低于正常妊娠组,而miR-513c-5p水平高于正常妊娠组(P均对照组>过表达组,P均<0.05.结论 URSA患者血清IL-10蛋白水平降低,而PBMC中miR-513c-5p表达升高;miR-513c-5p可能通过碱基互补结合直接抑制靶基因IL-10 mRNA转录及蛋白表达,打破母胎免疫耐受状态导致流产;靶向调控miR-513c-5p/IL-10信号通路可能成为临床治疗URSA的有效途径.