人呼吸道合胞病毒转录调节基因转染肺腺癌细胞系的研究

摘要

目的获得稳定表达人呼吸道合胞病毒(hRSV)M2-1基因的人肺腺癌细胞系.方法通过基因重组法构建hRSV M2-1基因真核表达载体,用脂质体将其转染人肺腺癌PAa和A549细胞,经G418筛选获得阳性表达细胞株,并用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western Blot进行验证.结果得到了约650bp的基因插入片段,DNA测序表明该基因高度保守.筛选出了稳定高量表达M2-1基因的PAa和A549细胞,并被证实有M2-1蛋白表达.结论获得了稳定表达hRSV M2-1蛋白的PAa和A549细胞株.