都匀毛尖茶浸提液对人肝星状细胞增殖的影响及其机制

摘要

目的探讨都匀毛尖茶浸提液对人肝星状细胞增殖的影响及其机制。方法体外培养人肝星状细胞LX-2,分别予0、5、10、20、40、80、160、320、640μg/mL都匀毛尖茶浸提液处理24 h,收集细胞,采用CCK-8法检测细胞活性,选择低于LX-2细胞半数抑制活性(IC50)时都匀毛尖茶浸提液浓度进行后续实验。另取LX-2细胞,随机分为空白对照组、模型组以及茶浸提液低、中、高浓度组和阳性对照组,空白对照组不予任何处理,常规培养26 h;模型组予0.5μg/mL脂多糖(LPS)预处理2 h后常规培养24 h;茶浸提液低、中、高浓度组予0.5μg/mL LPS预处理2 h后分别加入低、中、高浓度都匀毛尖茶浸提液处理24 h;阳性对照组予0.5μg/mL LPS预处理2 h后加入5μmol/L水飞蓟宾处理24 h。收集各组细胞,采用RT-qPCR法检测炎症因子IL-6、TNF-α、COX-2 mRNA表达,采用Western blotting法检测炎症因子IL-6、TNF-α、COX-2及NF-κB信号通路NF-κB p65、p-NF-κB p65、IκBα、p-IκBα蛋白表达。结果0、5、10、20、40、80、160、320、640μg/mL都匀毛尖茶浸提液呈浓度依赖性抑制LX-2细胞活性(F=60.160,P0.05。因此,选择40、80、160μg/mL都匀毛尖茶浸提液分别作为茶浸提液低、中、高浓度组进行后续实验。与空白对照组比较,模型组炎症因子IL-6、TNF-α、COX-2 mRNA和蛋白表达显著升高(P均<0.05);与模型组比较,茶浸提液低、中、高浓度组炎症因子IL-6、TNF-α、COX-2 mRNA和蛋白表达显著降低(P均<0.05)。与空白对照组比较,模型组NF-κB信号通路p-NF-κB p65、p-IκBα蛋白表达显著升高(P均<0.05);与模型组比较,茶浸提液低、中、高浓度组p-NF-κB p65、p-IκBα蛋白表达显著降低(P均<0.05)。结论都匀毛尖茶浸提液能够抑制人肝星状细胞增殖,其机制可能与抑制NF-κB信号通路活化而减少炎症因子产生有关。