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rsmA调控基因的筛选及其相关表型测定

     

摘要

为了筛选对rsmA具有调控功能的相关基因及这些基因对铜绿假单胞菌致病性的影响,通过构建染色体组上整合有rsmA—IuxCDABE报道子的铜绿假单胞菌菌株,并以rsmA基因表达为线索进行随机转座突变,利用发光变化筛选出对rsmA基因表达有影响的转座突变体.最终共得到约30000个克隆,经筛选得到20株发光明显变化的突变体,其中rsmA表达增强的有6个克隆,而rsmA表达减弱的有14个克隆.通过随机PCR并对产物测序及比对,最终确定7个被破坏的基因.对致病性相关表型测定,结果表明细菌运动性、绿脓菌素、鼠李糖脂和胞外多糖产量等均受到不同程度的调节.这些基因对rsmA表达有调节作用,并可能通过rsmA影响铜绿假单胞菌的多个致病因子及致病性.

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