miR-613通过靶向VEGFA抑制神经胶质瘤细胞的增殖、侵袭和血管生成

摘要

目的:旨在探究miR-613在胶质瘤中的表达及对细胞增殖、侵袭和血管生成的影响.方法:根据细胞转染将实验分组为对照miRNA组(Control组)、miR-613模拟物组(mimics组)和miR-613 mimics+VEGFA组(VEGFA组).采用逆转录定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测胶质瘤细胞和组织中miR-613和VEGFA mRNA的表达水平;采用荧光素酶报告基因分析miR-613与血管内皮生长因子(VEGF)的关系;采用Western blotting检测VEGFA蛋白的表达水平;通过体外实验检测转染细胞的增殖能力、侵袭能力和管状形成能力.结果:与正常组织样本相比,胶质瘤Ⅰ-Ⅱ期组样本的肿瘤细胞呈现异形,具有深核染色,并且肿瘤细胞密度适度较低,而胶质瘤Ⅲ-Ⅳ期组样本的肿瘤细胞的核分裂活跃,具有明显的微血管增殖和明显的细胞异型性;miR-613在胶质瘤Ⅰ-Ⅳ期组织样本中显著降低(P＜0.05).在U87和U251细胞系的VEGFA-WT组中,与Control组相比,mimics组的荧光素酶活性显著降低(P＜0.05).与Control组相比,U87和U251细胞系中mimics组VEGFA的mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P＜0.05).克隆形成实验、血管生成实验和细胞侵袭实验结果表明,与Control组相比,mimics组的克隆形成数量、细胞侵袭数、内皮细胞HUVEC的管状形成数和Ang-2蛋白表达水平均显著降低(P＜0.05);与mimics组相比,VEGFA组克隆形成数量、细胞侵袭数、内皮细胞HUVEC的管状形成数和Ang-2蛋白表达水平均显著升高(P＜0.05).结论:miR-613通过靶向VEGFA抑制了神经胶质瘤细胞的侵袭、增殖和血管生成,提示miR-613可能成为未来治疗胶质瘤的潜在靶点.