高三尖杉酯碱通过上调casp3和casp8表达发挥对骨肉瘤细胞系的抑制作用

摘要

目的探讨高三尖杉酯碱(HHT)对骨肉瘤细胞的抗肿瘤作用,并探讨其可能的作用靶点和机制。方法使用不同浓度的高三尖杉酯碱处理骨肉瘤细胞系(143b及U2-OS),通过CCK-8实验检测HHT对骨肉瘤细胞的抗肿瘤作用,集落形成实验检测骨肉瘤细胞的克隆能力,划痕实验检测骨肉瘤细胞的迁移能力,Transwell实验检测骨肉瘤细胞的侵袭能力,流式细胞学技术检测骨肉瘤细胞的凋亡率。并通过荧光定量PCR(qPCR)实验检测经过HHT处理后骨肉瘤细胞内基因表达情况的改变,并找出HHT作用于骨肉瘤细胞内可能的靶点和机制。结果CCK-8实验证实HHT对骨肉瘤细胞143b和U2-OS的增殖具有明显的抑制作用;集落形成实验、划痕实验、Transwell实验分别证实了HHT对骨肉瘤细胞143b和U2-OS的克隆能力、迁移能力、侵袭能力存在显著的抑制作用;流式细胞学技术证实了HHT能提高骨肉瘤细胞143b和U2-OS的凋亡率;RT-qPCR实验表明HHT可以显著上调casp3和casp8的表达,验证了HHT可能是通过调控casp3和casp8进而对骨肉瘤的增殖凋亡、侵袭及转移等发挥作用。结论casp3和casp8是HHT作用于骨肉瘤细胞的靶点,HHT通过上调casp3和casp8的表达来发挥对骨肉瘤细胞的抑制作用。