参芪复方对GK大鼠骨骼肌线粒体膜电位及相关促凋亡蛋白的影响研究

摘要

目的 探讨参芪复方对自发性糖尿病(Goto-Kakizaki,GK)大鼠骨骼肌线粒体膜电位及相关凋亡蛋白的影响.方法 采用高脂饲料喂养GK大鼠,建立糖尿病大鼠动物模型,造模成功后将GK大鼠随机分为模型组、罗格列酮组、参芪复方组,每组10只;10只Wistar大鼠作为空白对照组,普通饲料喂养.罗格列酮组灌胃给予0.67 mg/(kg·d)罗格列酮混悬液,参芪复方组灌胃给予14.33 g生药/(kg·d)参芪复方混悬液,空白对照组、模型组均每日灌胃给予同等体积生理盐水,连续给药8周.采用流式细胞检测线粒体膜电位;RT-qPCR和Western blot检测大鼠腓肠肌凋亡诱导因子(Aapoptosis inducing factor,AIF)、细胞色素C(Cytochrome c,Cyt c)、第二个线粒体衍生的半胱天冬蛋白酶激活因子(Second mitochondrial activator of caspase/direct IAP binding protein with low PI,Smac/DIABLO)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(Cysteinyl aspartate specific proteinase-9,Caspase-9)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Caspase-3)的蛋白和mRNA表达情况.结果 与空白对照组比较,模型组GK大鼠腓肠肌线粒体膜电位降低(P<0.05),AIF、Cyt c、Smac/DIABLO、Caspase-9、Caspase-3蛋白表达、mRNA表达增加(P<0.05);与模型组比较,罗格列酮组和参芪复方组线粒体膜电位均升高(P<0.05),罗格列酮组AIF、Cyt c、Smac/DIABLO、Caspase-9、Caspase-3蛋白表达、mRNA表达均降低(P<0.05),参芪复方组AIF、Cyt c、Caspase-9、Caspase-3蛋白表达、mRNA表达降低(P<0.05),Smac/DIABLO蛋白表达降低(P<0.05),Smac/DIABLO mRNA表达具有下降趋势,但差异无统计学意义(P>0.05).结论 参芪复方可通过上调线粒体膜电位,抑制促凋亡蛋白AIF、Cyt c、Smac/DIABLO从线粒体内释放出来,进而抑制Caspase-9、Caspase-3表达,减少骨骼肌细胞凋亡,发挥骨骼肌保护作用.