多烯磷脂酰胆碱联合阿托伐他汀对非酒精性脂肪性肝病小鼠的干预效果

摘要

目的 探究非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)小鼠核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)的表达和多烯磷脂酰胆碱(PPC)联合阿托伐他汀(ATO)治疗的干预效果.方法 从50只C57BL/6雄性小鼠中随机选取10只饲喂普通饲料(Normal组),40只饲喂甲硫氨酸胆碱缺乏(MCD)饲料用于构建NAFLD模型,实验共设置5组,每组10只:Normal组(生理盐水),Model组(NAFLD+生理盐水),PPC组(NAFLD+PPC),ATO组(NAFLD+ATO),Combine组(NAFLD+PPC+ATO).采用灌胃给药(给药剂量为PPC:0.1 mL/kg,ATO:4 mg/kg),Normal组和Model组灌胃等量生理盐水,每天1次,连续7周.测定小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、血清胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)以及高密度脂蛋白(HDL)的表达,使用酶联免疫吸附法(ELISA)测定小鼠血清炎症因子IL-18以及IL-1β水平.采用苏木素-伊红(H&E)染色观察小鼠肝脏组织病理损伤程度,使用Masson染色检测肝脏组织纤维化程度,采用免疫组化染色检测小鼠肝脏组织中NLRP3的表达情况;同时使用Western blot检测NLRP3以及下游蛋白Caspase-1以及凋亡相关斑点样蛋白(ASC蛋白)的表达.结果 与Normal组相比,Model组小鼠的ALT、AST、TC、TG以及LDL含量显著增加(P<0.05),HDL含量明显降低(P<0.05),Combine组与Model组相比,ALT、AST、TC、TG以及LDL含量明显降低(P<0.05),HDL含量明显升高(P<0.05);Combine组血清炎症因子显著低于Model组小鼠(P<0.05);H&E以及Masson染色显示与Normal组相比,Model组肝脏组织结构紊乱以及纤维化程度增加,Combine组相比于Model组,肝脏组织结构紊乱以及纤维化程度降低.NLRP3免疫组化染色显示Model组肝脏组织NLRP3表达显著增加,Combine组与Model组相比,肝脏组织NLRP3表达明显降低(P<0.05);Western blot结果显示:Model组NLRP3、Caspase-1以及ASC的表达相比于Normal组显著升高(P<0.05),Combine组相比于Model组显著降低(P<0.05).结论 NAFLD小鼠NLRP3的表达显著增加,多烯磷脂酰胆碱联合阿托伐他汀对于NAFLD的治疗作用可能与降低NLRP3的表达密切相关.