BslA蛋白在减毒炭疽芽孢杆菌中的表达和功能分析

摘要

目的在减毒炭疽芽孢杆菌AP422中表达BslA蛋白,并分析其生物学活性。方法利用PCR方法从炭疽芽孢杆菌中扩增出bslA基因,克隆至穿梭质粒pDG148,采用电转化方法将表达载体转入减毒炭疽芽孢杆菌AP422后诱导表达重组BslA。并利用SDS-PAGE电泳、Western印迹、间接免疫荧光实验和流式细胞术分析目标蛋白的表达,并对其进行空间定位,最后用细菌黏附实验分析其生物学功能。结果 BslA蛋白在AP422中获得成功表达,且目标蛋白主要表达于菌体表面。表达BslA蛋白的AP422（pDG-BslA）菌株具有黏附宿主细胞表面的能力,该黏附能力与阳性对照A16R菌株基本一致。结论在减毒炭疽芽孢杆菌AP422中实现了BslA蛋白的功能性表达,为进一步研究该蛋白的功能和构建新的疫苗候选株奠定了实验基础。