褪黑素对氧化应激损伤小鼠睾丸支持细胞的作用及机制

摘要

目的探讨褪黑素对过氧化氢诱导的小鼠睾丸支持细胞TM4细胞氧化损伤的保护作用及相关调控机制。方法体外培养小鼠睾丸支持细胞TM4细胞,采用随机数字表法分为对照组、过氧化氢组、过氧化氢+褪黑素组以及褪黑素组,采用甲氮甲唑蓝法检测褪黑素和过氧化氢对TM4细胞生长的影响以及褪黑素对过氧化氢诱导的TM4细胞氧化损伤的保护作用;采用试剂盒检测细胞内丙二醛、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量;酶联免疫吸附法检测上清液中睾酮和促卵泡生成素(FSH)含量;Western blot检测细胞磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路相关分子PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt的蛋白表达。结果对照组、过氧化氢组、过氧化氢+褪黑素组、褪黑素组细胞存活率分别为(1.00±0.17)%、(0.73±0.05)%、(0.92±0.04)%、(1.14±0.08)%,各组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论褪黑素能有效抑制过氧化氢诱导的TM4细胞氧化应激损伤,其机制可能与激活PI3K/Akt信号通路相关。