转化生长因子β1诱导SMMC—7721和HepG2肝癌细胞系发生上皮间质转化的最佳条件筛选

摘要

目的:探究转化生长因子 β1(transforming growth factor—β1,TGF—β1)诱导 SMMC—7721 和 HepG2肝癌细胞系发生上皮间质转化(epithelial—mesenchymal transition,EMT)的最佳条件.方法:采用不同浓度TGF-β1在不同条件下处理SMMC—7721和HepG2细胞,通过显微镜观察细胞形态及生长状态,蛋白免疫印迹检测细胞发生EMT前后分子标志物蛋白表达情况.结果:TGF-β1诱导SMMC—7721细胞系发生EMT的最佳条件:细胞传代培养24 h后,无血清培养基继续饥饿8 h,将培养基中的胎牛血清浓度降至0.5％并加入 5 ng/ml的TGF-β1,诱导72 h;TGF-β1诱导HepG2细胞系发生EMT的最佳条件:细胞传代培养24 h后,将培养基中的FBS浓度降至1％并加入5 ng/ml的TGF—β1,诱导96 h.结论:TGF—β1成功诱导SMMC—7721和HepG2细胞系发生EMT,并筛选出最佳诱导条件,为肝癌EMT的研究提供实验前提与基础.