变形链球菌葡聚糖结合蛋白D基因失活菌株的致龋特性研究

摘要

目的观察变形链球菌葡聚糖结合蛋白D(gbpD)基因失活菌株的生长、产酸、耐酸和形成生物膜的能力,为进一步明确GbpD蛋白的功能提供重要信息。方法将gbpD基因失活菌和野生菌分别厌氧培养,观察并比较其生长曲线和产酸、耐酸能力;分别在96孔酶标板中厌氧培养48 h后,使用结晶紫溶液染色,乙醇/丙酮混合液显色,测量OD575值,以定量反映生物膜形成量。以无菌唾液包被釉质片后分为两组,分别与gbpD基因失活菌和野生菌共同厌氧孵育48 h,扫描电镜观察釉质片表面形成的生物膜形态。结果gbpD基因失活菌株和野生菌的生长曲线及产酸、耐酸能力无显著性差异;gbpD基因失活菌株生物膜形成量OD值(0.30±0.10)显著低于野生菌(0.59±0.27);扫描电镜发现野生菌的生物膜厚而致密,菌细胞排列规则;突变菌株的生物膜结构菲薄,菌细胞排列紊乱。结论gbpD基因失活对变形链球菌的生物膜形成产生影响,推测GbpD蛋白可能与变形链球菌生物膜形成能力和生物膜结构有关。