SRF-miRNA-143-KLF-4信号通路在高糖诱导的人腹膜间皮细胞表型转换中的作用

摘要

目的 探讨Kruppel样因子4(KLF-4)在高糖刺激诱导的人腹膜间皮细胞(HPMC)表型转换中的作用.方法 以50mmol/L葡萄糖刺激HPMC 72h后,分别采用Real-time PCR及Western blotting检测KLF-4、上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、结缔组织生长因子(CTGF)及miRNA-143的表达.以LV-KLF-4及inhibitor转染高糖刺激72h后的HPMC,shRNA-KLF-4及mimic转染正常的HPMC,采用Real-time PCR及Western blotting检测KLF-4、E-cadherin、α-SMA、CTGF及miRNA-143的表达.结果 高糖刺激HPMC 72h后,Real-time PCR检测结果显示,KLF-4表达无明显变化,E-cadherin表达下降,α-SMA、CTGF及miRNA-143表达增加.Western blotting检测结果显示,KLF-4、E-cadherin表达下降.上调KLF-4表达后,HPMC中E-cadherin表达增加,而α-SMA、CTGF表达下降;下调KLF-4表达后,HPMC中E-cadherin表达下降,而α-SMA、CTGF表达增加(p＜0.05).结论 高糖刺激可以下调KLF-4蛋白的表达,SRF-miRNA-143-KLF-4信号通路轴参与了高糖刺激诱导的人腹膜间皮细胞表型转换过程.