顺铂作用于人恶性睾丸生殖细胞瘤NT2细胞后对肿瘤干细胞标志物的影响

摘要

为了探讨顺铂(cisplatin,CDDP)对人恶性睾丸生殖细胞瘤NT2细胞中干细胞标志物的影响,用20 μmol/LCDDP作用于处于对数生长期的NT2细胞12h、24 h、48h,采用免疫荧光、实时定量PCR和Western-blot法检测NT2细胞中干细胞标志物Sox-2、Oct-4、Nanog的细胞定位以及mRNA和蛋白质的表达情况,同时对肿瘤干细胞耐药相关基因ABCG2的表达进行实时定量PCR检测.与对照组相比,CDDP处理组细胞变圆且漂浮细胞数量增多,存留活细胞数量随药物作用时长增加而减少;免疫荧光显示Sox-2、Oct-4、Nanog主要定位在细胞质中;实时定量PCR和Western-blot分析结果都显示Sox-2、Oct-4、Nanog在CDDP处理组中的表达较对照组上调;同时ABCG2 mRNA的相对表达量在CDDP处理组显著增加(P＜0.05).研究结果初步表明,顺铂导致人恶性睾丸生殖细胞瘤NT2细胞的肿瘤干细胞耐药机制加强.