离子对反相HPLC测定小鼠骨髓BFU-E、CFU-E中PRPP合成酶活性

摘要

采用离子对反相高效液相色谱法(IPrHPLC)的单液等度洗脱,测定了小鼠骨髓红系爆增性集落形成单位(BFU-Es)与红系集落形成单位(CFU-Es)的PRPP合成酶活性.方法学研究表明,加入离子对试剂硫酸氢四丁基铵(TBAHS)后,ADP谱峰分离完全,其反应增加量易于计算.本法的批内变异系数平均值为-2.30%～-1.06%与1.06%-2.30%,平均相对偏差为0.81%～1. 74%,回收率为93.9%～98.5%,能达到操作简便、灵敏和准确的要求.采用本法测得20只正常昆明小鼠的BFU-E和CFU-E中该酶活性各为(0.563±0.027)μmol/(min·g·mL-1)与(O.416±O.026)μm01/(min·g·mL-1).