人血浆β淀粉样蛋白42 ELISA的建立及其临床初步应用

摘要

目的 建立人血浆中β淀粉样蛋白42(Aβ42)酶联免疫吸附试验(ELISA),并初步观察其对诊断阿尔茨海默病(AD)的应用价值.方法 用鼠抗Aβ42片段(1～28氨基酸残基)单克隆抗体包被微孔板,用生物素标记的兔抗Aβ42片段(40～42氨基酸残基)为标记抗体,应用生物素-亲和素系统(ABS)进行放大,采用棋盘滴定方法 确定最佳实验条件,用Aβ42标准品建立ELISA标准曲线,分别检测不同痴呆程度AD患者及健康人血浆中Aβ42水平.结果 本研究建立的方法 测定范围为20～500 pg/mL,最低检出量20 pg/mL,批内和批间变异系数(CV)分别为3.8%和7.9%.轻度AD患者血浆中Aβ42水平为(146.4±9.7) pg/mL,明显高于健康对照组[(95.1±7.2) pg/mL],中晚期AD患者血浆Aβ42浓度明显下降[(99.4±17.6) pg/mL],其水平降至与健康对照组差异无统计学意义.结论 建立的人血浆Aβ42 ELISA可作为AD早期诊断的有效方法 ,可在临床推广应用.