人血清载脂蛋白H的纯化与鉴定

摘要

为了研究载脂蛋白H(apoH)与疾病的关系, 分别用HClO4,(NH4)2SO4沉淀、DEAE-纤维素离子交换层析, 从人血清中纯化了载脂蛋白H. 用测定分子量, 分析氨基酸组成和N-端氨基酸测序三个方法进行鉴定. 用SDS-PAGE测得其相对分子量为54000.用高效液相色谱测定其中15种氨基酸的相对含量(mol/103mol残基)如下: Asp119.8, Glu108, Thr94.8, Ser78.6, Phe64.9, Gly1008, Ala57.2, Val57.2,Met10.6,Ile50.3, Leu77.1, Tyr31.9, His15.2,L-ys81.4,Arg39.4;在PE-ABI公司生产的475A型气相蛋白质测序仪上测得其N端10个氨基酸残基顺序如下: NH2-Gly-Arg-Thr-Cys-Pro-Lys-Pro-Asp-Asp-Leu.纯化得到的apoH与肝素有高的亲和性, 还能与乙肝表面抗原结合.纯化apoH的方法相对比较简单, 能达到测序的要求.