楸树花粉壁蛋白质提取及特异性

摘要

为了进一步研究楸树Catalpa bungei自交不亲和特性,以楸树不同产地植株云台山楸树（CB~（-1））,老山楸树（CB-2）和滇楸Catalpa fargesi f.duclouxii（CF）的花粉为对象,利用普通研磨法及超声波破碎法,研究了适合于花粉壁蛋白质提取的方法。同时采用考马斯亮蓝染色法及聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）比较了不同树种花粉蛋白质质量分数及其主要蛋白质组分。结果表明：超声波破碎法适于花粉壁蛋白质的提取,最佳超声参数为功率400 W,超声时间3 s·次~（-1）,间歇时间6 s·次~（-1）,3个回合,工作120次,相隔5 min·回合~（-1）。蛋白质提取液三羟甲基氨基甲烷（Tris-HCl）的pH 7.8最佳。不同树种的花粉壁蛋白质质量分数表现为滇楸最高,云台山楸树和老山楸树较低。蛋白质组分研究表明：各树种花粉共有蛋白质有26个,特异蛋白质为连楸53.8 k D,35.0 k D,23.4 k D,26.5 k D;老楸53.8 k D,38.5 k D,23.4 k D;滇楸38.5 k D,26.5 k D。