视黄醇X受体小分子配体衍生物对宫颈癌细胞周期及细胞凋亡的影响

摘要

为筛选视黄醇X受体α(RXRα)配体XS-23的衍生物中作用于细胞周期的化合物,通过蛋白免疫印迹检测细胞周期G0/G1期检查点关键负调控因子p21 WAF1/CIP1(简称p21)、细胞M期周期蛋白Cyclin B1的表达水平,从中筛选到两个编号分别为05和06的化合物,可导致人宫颈癌HeLa细胞中p21表达上调和Cyclin B1表达下调.用流式细胞术和siRNA干扰技术检测化合物对细胞周期的影响及其RXRα依赖性,结果显示:化合物05和06可引起G0/G1期细胞比例显著增加,同时G2/M期细胞比例显著下降,且化合物05和06引起p21表达水平上调的作用在一定程度上依赖于RXRα.用Annexin V-FITC/PI试剂盒检测细胞凋亡率,同时检测聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)切割蛋白水平及其RXRα依赖性,结果表明:化合物05和06均能够引起HeLa细胞凋亡率显著增加,并导致PARP切割且具有一定的RXRα依赖性.进而用计算机模拟的方法对化合物与RXRα进行分子对接,模拟化合物与RXRα可能的结合位点,结果显示化合物05和06可能与RXRα蛋白的helix12、helix3、helix4形成的表面区域结合.综上,筛选出的化合物05和06可能通过与RXRα表面结合,阻滞HeLa细胞周期于G0/G1期,最终诱导HeLa细胞凋亡.