影响血小板膜抗原检测的实验因素研究

摘要

目的 :探索流式细胞术检测血小板膜抗原表达的最佳标本制备方法。方法 :48例正常成人资料随机进入由不同标本类型、抗凝剂、标本放置时间和标本处理顺序组成的正交实验表 ,用流式细胞仪分别检测外周血血小板膜CD41a、CD42b和CD6 2P的表达情况。结果 :CD41a在PRP、肝素抗凝、2小时放置或先染色再固定的标本中的表达强度分别高于全血、ACD抗凝、放置 15分钟或先固定后染色的标本。CD42b强度除了放置时间对其无影响外 ,其余与CD41a类似。CD6 2P阳性率在PRP、肝素抗凝或 2小时放置的标本中分别高于全血、ACD抗凝或放置 15分钟的标本 ,而先染色后固定的血小板CD6 2P阳性率低于先固定后染色的标本。另外 ,标本放置 2小时后CD6 2P荧光强度增强 ,而先固定后染色的强度低于先染色的标本。结论 :不同标本类型、抗凝剂、标本放置时间和标本处理顺序对血小板膜抗原的表达均有不同程度的影响。最佳的标本制备方法为 :ACD抗凝全血标本在短时间内用 1%多聚甲醛固定后再行免疫染色 ,此法可将血小板自身活化减到最低水平。