创面无机诱导活性敷料促进糖尿病小鼠创面愈合的可行性及机制研究

摘要

目的 研究创面无机诱导活性敷料对糖尿病小鼠创面愈合的作用和机制。方法 以12只C57/BL6小鼠为对照组;24只db/db糖尿病小鼠按随机数表随机分为模型组和治疗组,每组12只。3组小鼠均于背部制备创面不愈合模型,模型组和对照组予常规换药,治疗组在常规换药后使用无机诱导活性敷料外用。分别于实验开始后第1、7、14天记录各组小鼠创面愈合率;第14天取材,采用苏木精-伊红染色观察小鼠创面组织形态;定量实时反转录聚合酶链反应PCR(real-time quantitative reverse transcription PCR,qRT-PCR)检测各组小鼠miR-200b表达;Western blot检测各组小鼠GATA2、血管内皮细胞生长因子受体2(vascular endothelial growth factor receptor 2,VEFGR2)蛋白相对表达量;采用免疫组化检测血小板-内皮细胞黏附分子-1(platelet endothelial cell adhesion molecule-1,PECAM-1)表达;采用ELISA检测肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)、CXCL5含量。结果 ①与对照组比较,实验开始后7天和第14天模型组创面愈合率降低,差异有统计学意义(P均<0.05);与模型组比较,实验开始后第7天和第14天,治疗组创面愈合率增加(P均<0.05)。②对照组和治疗组小鼠的上皮间隙缩小速度明显快于模型组,其肉芽组织在伤口处逐渐形成,而模型组的肉芽组织较少。③与对照组比较,模型组miR-200b相对表达量增加,差异有统计学意义(P<0.001);与模型组比较,治疗组的miR-200b相对表达量降低,差异有统计学意义(P<0.001)。④与对照组比较,模型组GATA2蛋白和VEGFR2蛋白相对表达量下降,差异有统计学意义(P均<0.001);与模型组比较,治疗组GATA2和VEGFR2蛋白相对表达量增加,差异有统计学意义(P均<0.001)。⑤与对照组比较,模型组的TNF-α、IL-6和CXCL5水平升高,差异有统计学意义(P均<0.001);与模型组比较,治疗组的TNF-α、IL-6和CXCL5水平降低,差异有统计学意义(P均<0.001)。⑥与对照组比较,模型组的CD31阳性表达量减少差异有统计学意义(P<0.001);与模型组相比,治疗组CD31阳性表达量增加(P<0.001),差异有统计学意义。结论 miR-200b-GATA2-VEGFR2信号轴对糖尿病小鼠创面愈合有重要的调控作用,创面无机诱导活性敷料可能通过调控该信号轴改善糖尿病小鼠创面不愈合。