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递呈BAE5单抗相关表位的M13噬菌体克隆系及其鉴定

             

摘要

[目的]获得可递呈BAE5单克隆抗体抗原表位的M13噬菌体克隆系。[方法]应用生物淘洗(Biopanning)方法, 从M13噬菌体随机12肽文库中筛选出能与BAE5单克隆抗体有阳性反应的噬菌体克隆系。通达ELISA竞争反应确定与 BAE5单抗结合率较高的克隆,鉴定这些阳性克隆与正常鼠血清,鼠抗M13血清和健康人IgG,IgA抗体的反应差异。[结果] 经过3轮淘洗,与BAE5单克隆抗体有阳性反应的克隆占83%(15/18)。其中竞争结合率>50%克隆有1、2、7、9、13、14号6 个克隆,它们与BAE5单抗的竞争结合率分别为56.3%、59.5%、58.0%、62.8%、56.4%、63.4%。其中只有1、9、14号克隆 的噬菌体与正常小鼠血清不显示交叉反应。[结论]来自1、9、14.号克隆的噬菌体递呈的抗原表位有别于其它克隆,适用于 BAE5单抗相关表位的研究。

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