非放射性标记ZF_3，ZF_4特异性探针对奶牛DNA杂交判断奶牛性别

摘要

在测定了奶牛ＺＦＸ和ＺＦＹ基因的部分序列基础上，设计出两条分别特异于ＺＦＸ及ＺＦＹ的探针（ＺＦ＿４）及（ＺＦ＿３），同时也是两条引物。采用非同位素方法（ＤＩＧＯｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ３＇ｅｎｄｌａｂｅｌｉｎｇｋｉｔ）标记两条探针，并对ＺＦＸ，ＺＦＹ两个克隆子进行杂交，对以雄性奶牛和雌性奶牛的杂色体基因组ＤＮＡ为模板以ＺＦ＿１和ＺＦ＿２￣［１］为引物的ＰＣＲ产物进行杂支，结果表明ＺＦ＿３特异于ＺＦＹ，ＺＦ＿４特异于ＺＦＸ基因。并以该两条探针对不同浓度梯度的ＤＮＡ模板的ＰＣＲ产物进行点杂交，结果表明ＺＦ＿３和ＺＦ＿４对ＰＣＲ的产物的杂交来判断奶牛性别其灵敏度可达到８ｐｇＤＮＡ量的水平。