鸡γ-干扰素基因的克隆与序列分析

摘要

为了研究鸡γ-干扰素(ChIFN-γ)基因的功能并进一步探究其在控制家禽传染病方面的应用,根据GenBank已发表的ChIFN-γ cDNA基因序列自行设计引物,应用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术从伴刀豆球蛋白A(ConA)刺激培养鸡脾淋巴细胞中提取的总RNA中扩增得到ChIFN-γ,然后连接到pMD18-T载体上并转化到Top10感受态细胞中,获得阳性重组质粒并进行正确性序列测序.核甘酸序列结果表明,试验得到了长为513 bp的ChIFN-γ基因,与原鸡(Gullus) IFN-γ的同源性可高达100%, 其含有1个495 bp的开放性阅读框架,编码164个氨基酸,推测其成熟蛋白的相对分子质量约为18 000.