异种MMP-2 DNA疫苗联合小剂量顺铂治疗肿瘤转移的实验研究

摘要

目的通过异种基质金属蛋白酶-2(MM P-2)DNA疫苗(c-MM P-2)联合小剂量的顺铂(DDP)治疗小鼠结肠癌肺转移,了解两者的协同治疗作用。方法构建编码与人类及鼠类高度同源的鸟类MM P-2分子的重组真核表达质粒作为DNA疫苗。建立负载小鼠结肠腺癌肺转移动物模型,将模型小鼠分为生理盐水对照组(N S组)、DDP治疗组(小鼠腹腔注射DDP 100μg/次,每周1次,连续2周)、c-MM P-2 DNA疫苗治疗组(小鼠后股肌肉注射1m g/mL疫苗100μL,每周1次,连续4周)、c-MM P-2 DNA疫苗联合DDP治疗组。在接种肿瘤细胞后第28 d断颈处死小鼠,取出肺并称其质量,检查并计数肺部>3 mm的肿瘤转移灶,免疫组化法测肿瘤组织微血管密度,TUNEL法测凋亡小体,EL ISA检测小鼠血清中的抗体滴度及类型。结果联合治疗组肺部肿瘤转移灶个数(3±1.64)少于c-MM P-2组(10±3.49,P=0.041)、DDP组(45±4.07,P=0.032)及N S组(85±8.70,P=0.003),肺的质量(0.4±0.03)g少于c-MM P-2组〔(0.8±0.06)g,P=0.044〕、DDP组〔(1.0±0.16)g,P=0.032〕及N S组〔(1.6±0.22)g,P=0.003〕,肿瘤组织中微血管密度低于对照组,T une l法显示凋亡小体明显增多,EL ISA法检测发现c-MM P-2治疗组和联合治疗组小鼠血清中有针对MM P-2的自身反应性抗体。结论异种MM P-2 DNA疫苗与小剂量的顺铂联合治疗恶性肿瘤转移有协同抗肿瘤转移作用。