中脑腹侧被盖区多巴胺转运体在丙泊酚全麻大鼠苏醒中的作用

摘要

目的 研究中脑腹侧被盖区(VTA)多巴胺转运体(DAT)在丙泊酚麻醉苏醒中的作用.方法 将60只大鼠随机分为正常对照组、6-OHDA毁损组、生理盐水组、丙泊酚麻醉组、AAV空载组、AAV2·DAT·RNAi组,每组10只.AAV干预大鼠预先经脑立体定位仪显微靶向注射AAV至VTA核团.各组大鼠经尾静脉以11 mg·kg-1的剂量缓慢推注丙泊酚进行麻醉诱导,后以70 mg·kg-1·h-1的剂量持续泵入丙泊酚,对照组以相同速度输注等剂量生理盐水,共30 min,停药10 min后取脑;采用免疫荧光染色观察VTA内DAT蛋白、前额叶皮层c-fos蛋白的表达情况;Western blot法检测PFC内c-fos的蛋白含量.通过翻正反射消失(LORR)时间和翻正反射恢复(RORR)时间记录丙泊酚麻醉诱导和苏醒时间;应用在体脑电记录大鼠麻醉期和苏醒期的脑电变化.结果 与NC组比较,6-OHDA组LORR时间缩短,RORR时间延长(P＜0.05);与生理盐水组比较,丙泊酚麻醉组VTA内DAT表达降低(P＜0.05);与NC组比较,AAV组LORR时间延长,RORR时间缩短,脑电图在丙泊酚麻醉期间α波、β波频率增多(P＜0.05),在丙泊酚苏醒期间β波频率增多,θ波频率减少,丙泊酚麻醉苏醒期间PFC中c-fos蛋白表达增多(P＜0.05);与NC组比较,AAV·NC组LORR时间和RORR时间、丙泊酚麻醉及苏醒期间的脑电图、丙泊酚麻醉苏醒期PFC中c-fos蛋白表达均无统计学差异(P＞0.05).结论 通过敲低VTA区DAT,可使PFC神经元活性增强,促进大鼠从丙泊酚麻醉中苏醒.