Long R^3-IGF-Ⅰ的克隆表达

摘要

在重组质粒pExSecI-IGF-的基础上,采用基因克隆方法合成了长链人胰岛素样生长因子(Long R3-IGF-)基因序列,构建基于该基因的重组原核表达质粒.将重组质粒转入E.coli,并对其表达条件进行了优化.实验结果表明,在37℃,IPTG终浓度0.6 mmol/L,诱导3 h条件下,Long R3-IGF-以包涵体形式可得到高效表达.将包涵体变性溶解后通过分离纯化,目的蛋白纯度达到95%以上.通过尿素梯度透析复性法对变性包涵体复性,复性率达到66%.