siRNA对HepG2细胞survivin表达的抑制作用

摘要

目的研究siRNA对肝癌细胞株HepG2中survivin基因表达的抑制作用.方法设计、合成一对survivin编码基因的反向重复序列,中间间隔9个核苷酸序列,通过定向克隆至载体P Silencer 2.1,构建siRNA真核表达载体,经稳定转染HepG2细胞后应用RT-PCR及流式细胞术检测肝癌细胞中survivin基因mRNA及蛋白质表达的抑制情况.结果测序证实siRNA真核表达载体构建成功.通过RT-PCR及流式细胞术检测,siRNA在mRNA及蛋白质水平抑制survivin基因表达分别达73%和75%.结论构建的P Silencer(+)-survivin重组质粒能有效抑制survivin基因在肝癌细胞株HepG2中的表达,从而为肿瘤的生物学治疗提供了新的方法和材料.