CDC123在乳腺癌细胞中的表达及其机制

摘要

目的探讨细胞分裂周期蛋白123(CDC123)在乳腺癌中的表达及其调控乳腺癌细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡的作用机制。方法使用UALCAN(阿拉巴马大学癌症数据分析门户)、Kaplan-Meier plotter(KM生存分析工具)、GEPIA(基因表达谱交互分析在线)等在线数据库分析CDC123在乳腺癌中的表达情况及患者预后。采用qRT-PCR技术分析收集的16例乳腺癌患者的乳腺癌组织和癌旁组织中CDC123的表达,并用蛋白印迹法检测人正常乳腺细胞MCF-10A和乳腺癌细胞株SKBR3、MDA-MB-231、MCF-7中CDC123的表达情况,选择MCF-7细胞作为后续实验对象。细胞实验分为3组:空白对照组(只转染Lipofectamine2000)、阴性对照组(共转染Lipofectamine2000和NC序列)和si-CDC123组(共转染Lipofectamine2000和si-CDC123序列)。CCK-8实验检测各组细胞增殖能力;Transwell实验和划痕损伤实验检测各组细胞侵袭和迁移能力;流式细胞仪检测细胞凋亡情况;Western blot法检测各组细胞EMT相关蛋白(E-cadherin、N-cadherin、Vimentin)和Wnt/β-catenin通路相关蛋白(β-catenin、c-myc、Cyclin D1)的表达水平。结果生信分析结果显示CDC123在乳腺癌组织中表达量均高于正常乳腺组织(P<0.05),且CDC123的表达量与患者的总生存期(OS)、无复发生存期(RFS)和无转移生存期(DMFS)呈负相关(P<0.05)。qRT-PCR结果显示,与癌旁组织相比,CDC123在乳腺癌组织中表达量增高(P<0.01)。Western blot结果显示相较于人正常乳腺细胞MCF-10A,CDC123在不同乳腺癌细胞系SKBR3、MDA-MB-231、MCF-7中的表达明显增高(P<0.05)。干扰CDC123的表达抑制乳腺癌细胞的增殖、侵袭、迁移能力并促进细胞凋亡(P<0.05)。CDC123表达敲减后,在乳癌细胞MCF-7中E-cadherin的表达上调,而N-cadherin、Vimentin、β-catenin、c-myc和Cyclin D1表达下调(P<0.05)。结论CDC123在乳腺癌中表达上调,并可通过Wnt/β-catenin信号通路诱导EMT进程,促进乳腺癌进展,导致不良预后。