睾酮对棕榈酸诱导的睾丸支持细胞受损的保护作用

摘要

目的 以棕榈酸(palmitic acid,PA)诱导小鼠睾丸支持细胞损伤为体外模型,探究睾酮对支持细胞的保护作用.方法 体外培养小鼠睾丸支持细胞(TM4)并随机分为3组进行相应处理,分别为对照组(仅溶剂)、PA模型组(PA 1 mmol/L)、PA模型睾酮干预组(PA 1 mmol/L+睾酮2μg/ml).培养的TM4细胞进行相应处理24 h后,CCK8检测细胞存活率,并使用实时定量PCR和Western blot检测TM4细胞中组成血睾屏障的主要连接分子Occludin和ZO-1的表达;采用试剂盒检测抗氧化酶活性和谷胱甘肽的含量;RT-PCR评价抗氧化因子的mRNA表达.结果 与对照组相比,PA模型组TM4细胞存活率显著降低,Occludin mRNA和蛋白水平以及ZO-1 mRNA水平显著下降(P<0.05);与PA模型组相比,睾酮干预后,TM4细胞存活率显著升高,且Occludin的mRNA和蛋白水平以及ZO-1 mRNA表达显著升高(P<0.05).与对照组相比,PA模型组超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性显著降低,谷胱甘肽(GSH)含量显著下降(P<0.05);与PA模型组相比,睾酮干预后,SOD和CAT活性显著提高,GSH含量显著升高(P<0.05).与对照组相比,PA模型组抗氧化因子Nrf2、HO-1、CAT和NQO-1的mRNA表达水平显著下降(P<0.05);与PA模型组相比,睾酮干预后Nrf2、HO-1、CAT和NQO-1的mRNA表达均显著升高(P<0.05).结论 PA可诱导体外培养的睾丸支持细胞(TM4细胞)损伤,睾酮可提高T M4细胞的抗氧化酶活性而行使保护作用.