帕金森病大鼠模型的建立及其行为学评价的实验研究

摘要

目的 建立高效、稳定的帕金森病大鼠模型,通过行为学测试和病理学检测对模型成功率和稳定性进行综合评价,为实验后期神经干细胞移植治疗帕金森病大鼠模型提供实验依据.方法 从50只健康雄性SD大鼠中,随机挑选20只作为正常组,另外30只纳入PD模型组,采用6-羟基多巴胺单侧两点注射法,进行内侧前脑束脑立体定位损伤,分别于术后1周、2周、3周腹腔注射阿朴吗啡检测旋转行为,转圈数≥210 r/30 min为成功帕金森病模型.分别采用旷场实验、露台水迷宫实验评价模型组大鼠与正常组的行为学差异.模型组与正常组大鼠随机选取2只,采用4%多聚甲醛心脏灌注后取脑制作冰冻切片,分别进行HE染色和酪氨酸羟化酶免疫组化染色,观察模型组与正常组大鼠脑黑质神经元的变化情况.结果 6-羟基多巴胺单侧两点注射内侧前脑束法成功获得21只帕金森病模型大鼠.旷场实验结果显示PD模型组大鼠的直立次数和运动总距离均明显低于正常组(P<0.01),PD模型组的中央格停留时间明显长于正常组(P<0.01);与正常组相比,PD模型组的露台水迷宫寻台时间明显延长,寻台速度明显下降(P<0.01);HE染色结果显示,PD模型组大鼠右侧黑质区域神经元胞体形态不规则、结构不清、数量明显低于正常组;TH免疫组化结果显示PD模型组大鼠右侧黑质区TH阳性表达明显减少.结论 实验表明6-羟基多巴胺单侧两点注射内侧前脑束是一种有效的建立帕金森大鼠模型的方法.为后期神经干细胞移植治疗帕金森病提供了高效、稳定的模型基础,即有利于客观、有效评价细胞移植治疗效果,又是探索细胞移植治疗帕金森病的有效途径.