棉铃虫烟碱类乙酰胆碱受体α7亚基基因的鉴定及功能分析

摘要

为探究和挖掘更多杀虫剂靶标受体,采用PCR方法结合RACE技术克隆了棉铃虫烟碱类乙酰胆碱受体(nicotinic acetylcholine receptor,nAChR)的α7亚基(nAChR-α7)基因,通过荧光定量PCR技术进行时空表达分析,并采用电生理检测以及RNAi技术研究该基因对棉铃虫生长发育的调控作用。结果表明,棉铃虫nAChR-α7基因(GenBank登录号:KM884875)全长3632 bp,包含编码496个氨基酸的1491 bp开放阅读框。该基因具有nAChR典型结构,与其他鳞翅目昆虫nAChRα7基因同源性较高,且包括胞外N端配体结合区、半胱氨酸环、Loop A~Loop F、跨膜区(TM1~TM4)和1个短的C端胞外尾。nAChR-α7基因在棉铃虫幼虫头部及成虫期高表达;通过将nAChR-α7基因在非洲爪蟾Xenopus oocytes卵母细胞中表达,并检测电生理信号,确定该基因是nAChR受体基因,但不能持续响应ACh信号。干扰试验结果显示nAChR-α7基因对棉铃虫幼虫生长发育无显著影响。推测该基因可能不是主要的nAChR基因,而是与其他亚基基因共同起作用。