含CATTGCT与含CATTCCT核心序列的两种寡核苷酸结合反应特性不完全相同

摘要

目的：比较含ＣＡＴＴＣＣＴ、ＣＡＴＴＧＣＴ核心序列的两种寡核苷酸与鸡骨骼肌核因子的结合反应，分析ＭＣＡＴ结合活性在鸡发育过程中的表达规律。方法：采用含ＣＡＴＴＣＣＴ或ＣＡＴＴＧＣＴ核心序列的不同寡核苷酸与发育阶段骨骼肌核抽提物进行胶阻滞实验及竞争反应。结果：胶阻滞实验显示各阶段鸡胚骨骼肌核抽提物与含ＣＡＴＴＣＣＴ核心序列的寡核苷酸形成Ｌ、Ｈ两条ＤＮＡ蛋白质阻滞条带，条带于出生后减弱，２周消失；含ＣＡＴＴＧＣＴ核心序列的寡核苷酸与第９～１３天鸡胚肌核抽提物结合反应形成Ｌ′、Ｍ′及Ｈ′３条阻滞带，出生后２周仍检出１条近似Ｍ′带的结合活性带；前者结合反应可被含ＣＡＴＴＧＣＴ核心序列的寡核苷酸和鸡乙酰胆碱受体γ亚基基因２０４／５０片段（含ＣＡＴＴＧＣＴ）竞争消除，但后者结合反应却不能被含ＣＡＴＴＣＣＴ核心序列的寡核苷酸完全竞争。结论：两种寡核苷酸除结合共同因子外，不排除特异因子的结合。胶阻滞差异可能与核心序列或侧翼序列不同有关；发育过程存在ＭＣＡＴ结合因子同工型的置换。