小鼠EG细胞体外分化为神经细胞的一种简单有效方法

摘要

【目的】探讨一种简单有效的小鼠EG（Embryonic germ cells,EG）细胞体外分化为神经细胞的方法。【方法】将昆明小鼠EG细胞在老化饲养层上培养3-4周,使EG细胞在高密度条件下向神经细胞分化,研究不同浓度维甲酸（Retinoic acid,RA）对EG细胞分化的诱导效果。【结果】小鼠EG细胞在高密度培养条件下向神经细胞分化,可获得较高比例的神经细胞样克隆,nestin染色阳性率达62.9%;经检测EG细胞分化产生的神经细胞样克隆外层细胞,以及从克隆中迁出的细长细胞均表达神经前体细胞标志nestin;在相同RA浓度下,随着EG细胞分化时间的延长,TH^＋（tyrosine hydroxylase,TH）神经细胞的比例增加;而在不同RA浓度下,随着RA浓度的升高,TH^＋神经细胞的比例呈增加趋势,经RA诱导14 d,最高可获得（2.3±0.2）%的TH^＋神经细胞。【结论】昆明小鼠EG细胞在老化饲养层上高密度培养条件下,能自发分化为神经细胞,RA诱导可显著提高分化细胞群体中TH^＋神经元细胞的比例。试验建立的这种简单有效方法可用于EG细胞体外分化为神经细胞。